Буракова Л.П.
Бюллетень Лабораторной Службы №9 2001 с. 33
Электрофорез белков сыворотки крови является одним из наиболее информативных тестов, использующихся для оценки широкого спектра патологических процессов. Этот метод позволяет изучать биологические и физические характеристики протеинов и выявлять заболевания печени, почек, иммунной системы, злокачественную патологию, острые и хронические инфекции, а также осуществлять контроль за лечением.
Существует несколько разновидностей получения протеинограмм в зависимости от используемого носителя. В качестве носителя могут применяться фильтровальная бумага, пленка из ацетат-целлюлозы или крахмала, полиакриламидный или агарозный гели. Электрофорез на бумаге был введен в 50-х годах. С его помощью мы можем выделить пять фракций: одну альбуминов и четыре – глобулинов. Оценка результатов в этом случае проводится фотометрически после элюирования отдельных фракций белков или на денситометре.
В нашей лаборатории метод разделения белков сыворотки крови с помощью электрофореза на бумаге был поставлен в апреле 1998 года. Нами была принята его модификация, применяемая в Клинико-диагностической лаборатории Краевой клинической больницы. Разделение проводится на аппарате ПЭФ – 3 в боратном буфере рН 8,6. Для окраски бандов применяется раствор бромфенолового синего в трихлоруксусной кислоте.
Основными “ заказчиками “ протеинограмм стали два отделения ЦГБ – инфекционное и детское. Поэтому анализ полученных результатов проведен с учетом особого контингента больных в этих отделениях.
В результате проведенной работы было получено более 40 протеинограмм больных вирусным гепатитом (рис.1). Классически такие заболевания печени сопровождаются снижением уровней альбуминов и -глобулинов при повышении - и -глобулинов (рис.2). Наши исследования показали достоверное снижение доли альбуминов в 52,5% случаев, а снижение - глобулинов – в 60% случаев. Эти показатели отражают в основном белок-синтетическую функцию печени. Поэтому можно сделать вывод, что при данном заболевании эта функция печени страдает в 50-60% случаев. Повышение -глобулинов наблюдалось только у 17,5% больных, а в 5% случаев эта фракция достоверно снижалась. У пациентов со сниженной долей -глобулинов наблюдалось клинически более тяжелое течение гепатита с последующей хронизацией процесса. Фракция -глобулинов была повышена в 80% случаев, что укладывается в классические представления о данной патологии. Нескольким больным спустя 6 месяцев после выписки из стационара был проведен повторный анализ белковых фракций. У половины из них протеинограмма соответствовала таковой у здоровых людей, а у остальных сохранялось повышение доли -глобулинов, кореллирующее с персистированием HBS-Ag.
Таким образом, исследование белковых фракций пациентов с вирусным гепатитом является одним из наиболее информативных методов, позволяющим оценить состояние больного в острый период заболевания, прогнозировать развитие и исход болезни, а также контролировать процесс выздоровления.
Анализируя 370 протеинограмм пациентов детского отделения больницы, мы учитывали их возраст и клинический диагноз. Достоверные изменения в составе белковых фракций наблюдались при таких патологиях, как острая пневмония и нефропатия. В первом случае у всех обследуемых были повышены фракции - и - глобулинов (рис.3), а во втором – снижены альбумины и повышены - глобулины (рис.4), что закономерно при остром воспалении и потере белка через почечные канальца соответственно. К сожалению, не была проведена параллельно дифференцировка типов протеинурии с помощью электрофореза мочи, что позволило бы более полно оценить нарушения почечной функции. При таких патологиях, как вегетососудистая дистония (ВСД), дискинезия желчевыводящих путей (ДЖВП) (рис.5), лямблиоз, хр. гастрит, остеохондроз, сколько - нибудь значительных изменений в протеинограммах по сравнению с нормой (рис.6) выявлено не было. В связи с этим, вызывает сомнение целесообразность назначения таких исследований при данных патологиях.
Очень затрудняет работу отсутствие денситометра и компьютерной техники, использование которых позволило бы повысить производительность труда и точность выдаваемых показателей.
Таким образом, проанализировав полученные результаты, можно сделать следующие выводы:
Электрофорез белков крови является информативным методом лабораторной диагностики при таких патологиях, как вирусный гепатит, острые воспаления, почечные патологии.
При нефропатиях необходимо параллельное проведение электрофореза белков мочи, для чего в нашей лаборатории надо отработать соответствующую методику.
Необходим более дифференцированный подход клиницистов к назначению данных исследований при таких патологиях, как ВСД, ДЖВП, остеохондроз, лямблиоз.
Необходимо расширять возможности данного метода за счет использования более современных элекрофоретических анализаторов и лабораторной компьютерной системы, так как ручная обработка результатов очень снижает производительность труда и их точность.
Рис.1. Диаграмма, отражающая протеинограммы больных вирусным гепатитом.
Примечание: во всех протеинограммах 1соответствует фракции альбуминов, 2- глобулинов, 3- глобулинов, 4- глобулинов, 5- глобулинов.
ЛИТЕРАТУРА
1.Гааль Э., Медьеши Г., Верецки Л., Электрофорез в разделении биологических молекул. – М: Мир – 1982. – 446 с.
2. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. – М: Наука – 1981 – 390с.
3. Руководство по клинической лабораторной диагностике/ под ред. В.В.Меньшикова – М:Медицина – 1982 – 576 с.
4. Современные методы в биохимии/ под ред. В.Н.Ореховича – М: Медицина – 1968 – 372 с.
5. Н.А.Сергеева//Клин. лаб. диагн.- 1999 - №2.- с25-32.
Источник: www.medlab.scn.ru