СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОДХОДОВ ДИАГНОСТИКИ АТИПИЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ
Старченко С.М., Костюк С.А., Сычев А.Л.
Белорусская медицинская академия последипломного образования, Центральная научно-исследовательская лаборатория, Республика Беларусь, г. Минск
В последнее время одним из наиболее перспективных методов, используемых для этиологической диагностики хламидийно-микоплазменных инфекций дыхательных путей, является полимеразная цепная реакция (ПЦР), основанная на определении ДНК/РНК возбудителя [1]. Однако, возможности ПЦР-диагностики во многом зависят от качества забора биологического материала и эффективности выделения ДНК из инфекционных агентов, находящихся в диагностическом материале (соскобы эпителиальных клеток, моча, мокрота, пунктаты внутренних органов) [2]. Возбудители хламидийно-микоплазменной природы обладают тропизмом к клеткам столбчатого цилиндрического эпителия слизистых оболочек человека. Следовательно, в диагностическом плане ключевую роль играет эпителиальный соскоб со слизистых оболочек верхних дыхательных путей.
Материалы и методы
Целью настоящего исследования явилось определение влияния качества забора биологического материала на эффективность молекулярно-генетической диагностики инфекций дыхательных путей. Для установления этиологии воспалительного процесса методом ПЦР было обследовано 17 детей (1-15 лет) с диагнозом острый и хронический бронхит и двухсторонняя пневмония атипичной природы.
У 12 пациентов соскоб эпителиальных клеток из носовых ходов, зева и слизистой поверхности щек производили с помощью стерильного одноразового зонда для забора биоматериала ("ВТК лабдиагностика" Регистр. удостовер. ИМ-7.4333 от 28.10.2003). Зонд опускали в приготовленную заранее пробирку (типа Эппендорф), содержащую 0,1 мл стерильного физиологического раствора, тщательно перемешивали, остатки жидкости на цитощетке отжимали о стенки пробирки. Вторую группу обследованных составили 5 детей, у которых забор материала проводился с помощью металлической ложки Фолькмана, которую вводили на глубину 1,0 см в носовые ходы или путем соскребания снимали поверхностный эпителий в области зева и слизистой поверхности щек. Биологический материал помещали в 0,1 мл стерильного физиологического раствора. Транспортировку биологического материала осуществляли в специальном термоконтейнере с охлаждающим элементом. При заборе материала не допускалось попадание следов крови и большого количества слизи.
ДНК-позитивными в отношении возбудителей хламидийно-микоплазменной природы из группы детей, у которых забор материала проводился стерильным одноразовым зондом оказались 11 образцов. Сhl. trachomatis была обнаружена в 6 случаях, Сhl. pneumoniae - у 1 пациента , Myc. pneumoniae - в 4 случаях и Myc. hominis - в 7 случаях. При этом имел место смешанный характер инфекций. Во второй группе положительный результат был отмечен только у 1 ребенка с выявлением ДНК Myc. pneumoniae.
Таким образом, выявляемость микроорганизмов хламидийно-микоплазменной природы в первой группе составила 91,6%. Во второй группе данные инфекции были выявлены только в 20% случаев. Следовательно, для получения диагностически достоверных результатов по выявлению этиологического агента воспалительных процессов дыхательных путей методом ПЦР необходим качественный забор биологического материала с использованием стерильных одноразовых зондов для забора биоматериала. Это позволит уменьшить вероятность ложноотрицательных результатов и повысит качество проводимой диагностики.
1. Г.Г. Мусалииова, В.Н. Саперов. Диагностика и лечение микоплазменной и хламидийной пневмоний. // Лечащий врач. Октябрь 2004. №8. С. 46-50
2. И.М. Лаптева. Современные подходы к диагностике и лечению атипичных пневмоний. // Медицинские новости №2. 2000. С. 44-45.